超微量分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,儀器利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
分光光度計(jì)在日常的使用中,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不規(guī)范的問(wèn)題,下面就常見(jiàn)的一些問(wèn)題進(jìn)行討論。
日常在使用分光光度計(jì)時(shí),是否要經(jīng)常進(jìn)行儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查?答案是否定的。當(dāng)在日常測(cè)定中發(fā)現(xiàn)儀器測(cè)定靈敏度下降,這時(shí)才應(yīng)進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢查,簡(jiǎn)單并直接的檢查方法是:儀器開(kāi)機(jī)后,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)為580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀察到一長(zhǎng)方形的黃色光斑,說(shuō)明波長(zhǎng)準(zhǔn)確度屬正常范圍,否則就應(yīng)進(jìn)行波長(zhǎng)校正。
關(guān)于超微量分光光度計(jì)的預(yù)熱問(wèn)題:
1、在一般分光光度計(jì)的使用說(shuō)明書上,要求儀器預(yù)熱時(shí)間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計(jì),開(kāi)機(jī)后儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài),約需1O分鐘左右。
在分光光度計(jì)預(yù)熱這個(gè)環(huán)節(jié)上,很多使用者或多或少存在問(wèn)題,如開(kāi)機(jī)只預(yù)熱電路系統(tǒng)(不調(diào)節(jié)波長(zhǎng)、打開(kāi)吸收池暗箱蓋預(yù)熱等)或認(rèn)為初始化過(guò)程就是預(yù)熱等等。
2、對(duì)帶微處理器有自檢功能的分光光度計(jì),開(kāi)機(jī)后儀器自檢(初始化)結(jié)束后,在測(cè)定窗口上,設(shè)置所需波長(zhǎng)值,用一個(gè)吸收池裝上純凈水置于光路上,調(diào)“0000A”后,預(yù)熱儀器,當(dāng)儀器顯示讀數(shù)不再變化后即可進(jìn)行測(cè)定。
3、對(duì)于超微量分光光度計(jì),由于有雙光源(鎢燈與氘燈),為了延長(zhǎng)燈的使用壽命,開(kāi)機(jī)自檢完成后可以關(guān)掉測(cè)定時(shí)不用的光源燈。